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植物組織培養時常發生之現像及可能解決方法
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Symptoms
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Possible
Causes
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Possible
Answers
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培植體死亡
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消毒過甚
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使用較溫和方式消毒
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培養基鹽分太強
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培養基鹽改為 1/2 或 1/4 強度
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生長階段錯誤
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使用不同生長階段之培殖體
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培養基變色(變暗色)及培殖體死亡
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受污染
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拋棄輕忽的心態;檢查滅菌機器及環境衛生
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分泌物過多
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在未死亡前儘快轉移;時常繼代;培養基添加抗氧化物
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Agar的問題
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使用不同Agar
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水的問題
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檢查水是否純淨
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錯誤的培養基製備方式
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使用不同之製備方式及流程
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培殖體存活但不生長
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休眠
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冷處理一個月;使用不同生長階段之培植體
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培養基鹽分太強
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降低鹽類及生長調節劑濃度
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錯誤的培養基製備方式
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使用不同之製備方式及流程;將培殖體壓入培養基中;使用製成斜面之培養基,並到入未加Agar之原培養液,使半掩沒培殖體;培養基加活性炭
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生長太慢
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培養環境過冷或過熱
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改變環境溫度
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錯誤的培養基
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嘗試使用不同之培養基
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芽體太長及數目太少
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Cytokinin濃度太低
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增加Cytokinin濃度;增加空氣流;調整Cytokinin與Auxin之組合
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芽體太短
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生長調節劑濃度過高
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減低或去除生長調節劑
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培殖體不增殖
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Cytokinin濃度太低
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增加Cytokinin濃度;調整Cytokinin與Auxin之組合
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需要冷處理
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冷藏 4 ~ 8 星期
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環境溫度過低
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增加環境溫度
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需要休眠
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冷處理 3 ~ 8 星期
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肥大狀莖,小葉,色淡
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Cytokinin濃度太高
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降低Cytokinin濃度
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不理想之Callus
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生長調節劑錯誤
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降低或去除生長調節劑;調整Cytokinin與Auxin之組合;嘗試使用1~5
ppm TIBA(Triodobenzoic
acid);去除Auxin
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葉片黃化(白化)現像
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受污染
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檢查污染源
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環境溫度太高
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降低環境溫度
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錯誤的培養基
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使用不同之培養基
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葉片肉質化,玻璃質化
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不適當的滲透壓
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降低溫度;增加空氣流動;增加Agar強度
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Cytokinin濃度太高
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降低生長調節劑濃度;添加Phlorogucinol
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Agar使用錯誤
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嘗試使用不同Agar
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培養太久
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繼代頻繁
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過早發根
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生長調節劑比例錯誤
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增加Cytokinin,降低Auxin
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莖紅化現像
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逆境
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改變光照或溫度
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Sugar濃度太高
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降低Sugar濃度
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硝酸態氮不足
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增加硝酸態氮含量
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培養太久
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繼代頻繁
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