本標準作業程序參考 James Chen's lab, Fish Facility SOP 修改而成。
斑馬魚房標準作業程序記錄表 (2014年第4版)
一般作業程序:
- 魚房內的養魚設備分為系統缸與獨立缸,系統缸內除健康的斑馬魚以及餵飼用的豐年蝦外,不得容納任何其他生物。
- 除接入系統缸的進水系統之外,系統缸不得接受任何其他的水源。
- 為避免污染並保持魚群健康,不得使用其他水源操作系統缸內的魚,同時包括撈魚網在內之魚隻操作器具也不得混用。
- 除非絕對必要,禁止在暗週期(0AM~8AM)期間進入魚房。
- 魚房室內溫度應保持在 26~28˚C,水溫則應保持在 28.5˚C 以上。
- 產卵用之雄魚與雌魚應分缸飼養。飼養密度上限為 5隻/L。
- 每日應餵食兩次(12PM 及 6PM),產卵魚可於前一日加餵一次,週末可以只餵一次(2PM)。應避免過度餵食以及餵食不足。
- 每日應檢查魚體健康狀態,若系統缸內有疑似病魚,應立即移入獨立缸內。無論任何時候,發現死魚應立即移除。每月統計死亡率並列入記錄追蹤。
- 每日應檢查系統缸是否漏水、水路是否通順以及導電度是否正常。
- 每週應將系統缸之水槽換水30%,並清洗循環濾棉以及抽水馬達進水濾網。
- 每週應打掃房舍一次。
- 每週應測量並記錄各水質指數。
- 每月應清洗更換各系統缸一次,並更換濾棉。
- 每半年應更換系統濾心(大胖)。
- 每年應更換進水前處理濾心(小胖)及曝氣硝化槽各濾材。
- 每兩年應更換紫外線殺菌燈管。
水質(每週測量一次):
- pH = 6.5 ~ 7.5,可以酸、鹼緩衝溶液調整。
- 導電度 250~750 µS,若過低可以海鹽調整,過高則換水。導電度偏移會影響母魚產卵。
- 氨/胺 (NH3/NH4+)含量應少於 2ppm(mg/L),過高則換水。
- 亞硝酸鹽(nitrite,NO2)含量應少於 1ppm(mg/L),過高則換水。
- 硝酸鹽(nitrate,NO3)含量應少於 40ppm(mg/L),過高則換水。
餵食:
- 豐年蝦為主要的食物,理想狀態為每日餵食兩次,理想的餵食量為五分鐘內能被吃完為準。
- 也可以餵食乾飼料,但並不建議連續以乾飼料餵食,可以將乾飼料作為產卵缸加餐之食物。
- 乾燥豐年蝦卵應置於冰箱冷藏(4˚C),並避光保存。
- 豐年蝦卵孵化用水應以逆滲透水及海鹽(instant ocean salt,30g/L)配製。
- 孵化豐年蝦卵時,以空氣幫浦攪動孵化槽,豐年蝦應於24小時左右開始孵化。孵化的豐年蝦應於兩天內用盡,故應避免一次放入過多蝦卵。
幼魚:
- 斑馬魚幼魚於5日齡(自受精日起,5dpf)開始餵食。
- 斑馬魚幼魚以草履蟲(paramoecium)及剛孵化的豐年蝦為主食,14日齡後停止餵食草履蟲,僅餵食豐年蝦。
- 在曝氣水中加入少許脫脂牛奶(1%),加入草履蟲種群,靜置於室內,即可維持幼魚食物來源。
- 斑馬魚幼魚餵食草履蟲時(一天四次,草履蟲濃縮後餵食),應離開系統缸,待草履蟲被清除後,方可返回系統。
配對產卵:
- 產卵缸應於第二次餵食1小時之後(7PM 以後)再行設置。
- 每次使用1~3隻雌魚以及1~3隻雄魚產卵(建議1+1)。
- 每15~20分鐘收一次卵,第一次卵裂約在受精後30~45分鐘。
- 斑馬魚卵應置於 28.5˚C 保溫培養箱中。
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